熒光偏振理論

Perrin於(yu) 1926年首先描述了熒光偏振理論，他觀察到溶液中的熒光分子在受到偏振光激發時，如果在激發時分子保持靜止，該分子將發出固定偏振平麵的發射光（發射光仍保持偏振性）。然而，如果分子旋轉或翻轉那麽(me) 發射光的偏振平麵將不同於(yu) 初始激發光的偏振平麵。

分子的偏振性與(yu) 分子旋轉馳豫時間成比例，分子旋轉馳豫時間是分子轉過 68.5度角時所用的時間。 分子旋轉馳豫時間與(yu) 粘度、溫度、分子體(ti) 積和氣體(ti) 常數有關(guan) 。

原理 ： 當熒光分子受平麵偏振光激發時，如果分子在受激發時期（對於(yu) 熒光素約持續 4納秒）保持靜止，發射光將位於(yu) 同樣的偏振平麵。如果在受激發時期，分子旋轉或翻轉偏離這一平麵，發射光將位於(yu) 與(yu) 激發光不同的偏振麵。 如果用垂直的偏振光激發熒光素，可以在垂直的和水平的偏振平麵檢測發射光光強（發射光從(cong) 垂直平麵偏向水平平麵的程度與(yu) 熒光素標記的分子的遷移率有關(guan) ）。如果分子很大，激發時發生的運動極小，發射光偏振程度較高。如果分子小， 分子旋轉或翻轉速度快，發射光相對於(yu) 激發光平麵將去偏振化。 熒光顯微鏡 

熒光偏振的定義(yi) ：

熒光偏振的應用  https://www.leikon.cn

熒光偏振是特別用於(yu) 研究分子間相互作用的技術。這種方法直接及時的檢測示蹤分子的結合 /自由率。熒光偏振實驗在沒有固相支持的溶液中進行，允許在低至皮摩爾級的範圍內(nei) 分析真實的平衡。熒光偏振檢測並不摻雜樣品，因此樣品可以被再次處理並被重新分析用於(yu) 評價(jia) pH、溫度和鹽濃度改變對結合的影響。此外，熒光偏振實驗是實時進行的，並不局限於(yu) 平衡結合的研究。

應用領域概述  https://www.shkon.com

•  受體(ti) /配體(ti) 研究（如激素/受體(ti) 檢測）

•  蛋白質 /多肽相互作用

•  DNA/蛋白質相互作用

•  酪氨酸激酶檢測

•  競爭(zheng) 性免疫檢測

熒光偏振技術的優(you) 勢

熒光偏振技術比研究蛋白質與(yu) 核酸結合的傳(chuan) 統方法具有更多優(you) 勢（特別是不生成有害的放射性廢物）並且檢測限更低，可達亞(ya) 納摩爾級範圍。此外熒光偏振是真正均相的，允許實時檢測（動力學檢測），對於(yu) 濃度變化不敏感，是均相檢測形式（中間不含洗滌步驟）的*解決(jue) 方案。

熒光偏振  https://www.shkon.com.cn

ACTA POLYMERICA SINICA No. 4 （ 1998 ）